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人體細胞
細胞名稱 |
培養條件: |
傳代方法 |
貨號 |
UT-7 人急性成巨核細胞白血病細胞 |
DMEM+10% FBS +1%雙抗 |
維持細胞濃度在1.0~1.5×106 cells/ml,1:2傳代,2~3天1次。 |
C1171 |
詳細介紹:
細胞名稱 人類原巨核細胞型白血病細胞;UT-7
形態特性 圓形
生長特性 懸浮生長,有1%~2%的細胞可輕微貼壁。
特征特性 該細胞于1988年建系;源于一名64歲患有急性粒細胞白血病(AML M7)的男性的骨髓;對多種細胞因子有反應。
培養條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS;5-7u/ml Epo
傳代方法 維持細胞濃度在1.0~1.5×106 cells/ml,1:2傳代,2~3天1次。
傳代情況 C7
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
相關資料:
支原體檢測 培養法(-)
STR
Amelogenin:X,Y;CSF1PO:12;D13S317:8;D16S539:10,12;D18S51:14,17;D19S433:14,14.2;D21S11:31.2;D2S1338:18,23;D3S1358:16;D5S818:12;D7S820:8;D8S1179:11,15;FGA:23;TH01:6,9;TPOX:10;vWA:14,18,19;
同工酶
染色體
使用權限 A類
細胞服務內容:
1、協助引進科研急需 的細胞株/系。
2、提供細胞保藏服務。
3、提供細胞供應服務。
4、提供細胞篩選或建立特殊細胞株/系的服務。
5、 提供與細胞培養配套的部分試劑
6、 提供支原體等各項檢測的技術服務
細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1) 準備培養基;北美胎牛血清,10%;雙抗1%。
2) 培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。 3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二.細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。 對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法: 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
1. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
2. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
3. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。 下面T25瓶為例;
1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,細胞變圓脫落后,加入2ml完全培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
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