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即用型PCR試劑盒

牛、羊、豬布魯氏菌 PCR 試劑盒

文字:[大][中][小] 2017-6-4    瀏覽次數:792    
產品及特點:


布魯氏菌病(brucellosis)又稱地中海弛張熱,馬耳他熱,波浪熱或波
狀熱,是由布魯氏菌(Brucellae)引起的人畜共患性全身傳染病。布魯氏菌為革
蘭氏陰性短小桿菌,初次分離時多呈球狀,球桿狀和卵圓形,故名。根據宿主
的不同,布魯氏菌分為 10 個種。目前已知有 60 多種家畜、家禽,野生動物
是布魯氏菌的宿主。與人類有關的傳染源主要是牛布魯氏菌(Brucella
abortus)、羊布魯氏菌(Brucella melitensis)及豬布魯氏菌(Brucella
suis)。臨床上以羊、牛、豬三種意義最大,羊種致病力最強。因此基于 PCR
的快速檢測羊、牛、豬種布魯氏菌病具有重要的應用價值。本產品就是專門用
于檢測羊、牛、豬種布魯氏菌病的 PCR 試劑盒,它具有下列特點:
1. BA、BM 和 BS 分別用于定性檢測牛、羊、豬布魯氏菌病,靈敏度遠高于
ELISA 檢測法。
2. 專一性強,能分別檢測到各菌的幾乎所有亞型。
3. 引物根據全基因序列設計,特異性高。
4. 使用即用型 PCR 試劑盒,減少了操作步驟,降低了操作誤差。


運輸及保存:



 低溫運輸,-20℃保存,保存期限一年。


使用方法:


一、樣品 DNA 的制備
用自選方法純化待測樣品的 DNA,也可以另購本公司的細菌 DNAout 或
柱式細菌 DNAout,上述兩款產品跟本試劑盒兼容。
二、陽性對照
1. 為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體細菌做陽性
對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 使用本陽性對照時,由于其濃度較高,一定要注意不要污染其他試劑和成
分。最好在專門的區域操作。
三、設置 PCR 反應(60 uL 體系)
3. 在 PCR 管中加入下列成分:
成 份 樣品 陽性對照 陰性對照
牛、羊、豬布魯氏菌專一性引物對
(三種之一) 2 uL 2 uL 2 uL
樣品 DNA 1-5 uL 無 無
牛、羊、豬布魯氏菌陽性對照
(三種之一) 無 2 uL 無
補超純水到 30 uL 30 uL 30uL
即用型 PCR Mix 3.0 30 uL 30 uL 30 uL
4. 輕柔混勻后上機,按下面參數進行 PCR。
過程 溫度 時間
預變性 95℃ 5 min
PCR 反應
(40 個循環)
95℃ 1 min
55℃ 1 min
72℃ 3 min
延伸 72℃ 10 min
5. 電泳檢測 PCR 產物。BA 預期的 PCR 產物長度為 783 bp;BM 預期的
PCR 產物長度為 162 bp;BS 預期的 PCR 產物長度為 393 bp。

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