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技術(shù)文獻(xiàn)

人基質(zhì)金屬蛋白酶9ELISA 標(biāo)準(zhǔn)品檢測(cè)前準(zhǔn)備工作

文字:[大][中][小] 2020-5-14    瀏覽次數(shù):581    
人基質(zhì)金屬蛋白酶9ELISA 標(biāo)準(zhǔn)品檢測(cè)前準(zhǔn)備工作:
1.請(qǐng)?zhí)崆?0分鐘從冰箱中取出試劑盒,平衡至室溫。
2.將濃縮洗滌液用雙蒸水稀釋(1:25)。未用完的放回4℃。從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié) 晶,屬于正常現(xiàn)象,可用40℃水浴微加熱使結(jié)晶完全溶解后再配制洗滌液(加熱溫度不要超 過(guò)50℃,使用時(shí)洗滌液應(yīng)為室溫)。當(dāng)日使用。

1.)使用前將所有的試劑和標(biāo)本緩慢均衡至室溫(18-25oC),試劑不能直接在37oC溶解。
2.)標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品):每瓶標(biāo)準(zhǔn)品加入標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1mL,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為1000pg/mL。準(zhǔn)備7個(gè)稀釋標(biāo)準(zhǔn)品的EP管,每個(gè)EP管中加入150μL的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液,如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度,標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。人腫瘤壞死因子α(TNFα)檢測(cè)試劑盒為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
4.生物素化抗體工作液:實(shí)驗(yàn)前計(jì)算當(dāng)次實(shí)驗(yàn)所需用量(以100μL/孔計(jì)),實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配 制100-200μL。使用前15分鐘,以生物素化抗體稀釋液稀釋濃縮生物素化抗體(1:100)成工作 濃度。當(dāng)日使用。
5.酶結(jié)合物工作液:實(shí)驗(yàn)前計(jì)算當(dāng)次實(shí)驗(yàn)所需用量(以100μL/孔計(jì)),實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制 100-200μL。使用前15分鐘,以酶結(jié)合物稀釋液稀釋濃縮HRP酶結(jié)合物(1:100)成工作濃度。 
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