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技術(shù)文獻

SMMC7721-GFP熒光標記細胞株細胞處理

文字:[大][中][小] 2020-10-29    瀏覽次數(shù):613    
SMMC7721-GFP熒光標記細胞株細胞處理
1)復(fù)蘇細抱:將會有1mL細胞液的凍存管迅速放入37て水浴中(水回要低于存管蓋部)見解點,移入事先準好的含有4mL培養(yǎng)
基的15ml高心管中混合均勻。在1000RPM條件下高心4分鐘,棄云上清液,加入1mlL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細抱懸液移入?有5ml
培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并查細密度。
2)細胞,傳代可參考以下方法
方法一:收集細抱,1000RPM,常條件下離心5分鐘,?去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細長液按1:2到1:5的比例分到
新的?8m培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中
方法ニ:可遠擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細抱懸起,將細抱懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8m培養(yǎng)基的新皿
或善瓶
3)細凍存:待細生長狀態(tài)良好
存上清液(防止細抱吸走),加入部分新年培養(yǎng)基,吹打均勻后,加入到凍存管中,在東存管中加入10%DMSO勻后進行凍存。凍存
凍存細抱時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。
1)細抱凍存培養(yǎng)基是一種用于乳動物細的卻用型完全凍存培養(yǎng)基,其所含治牛血清和牛血清例經(jīng)過優(yōu)化,可改善細抱活力以及解
凍后的細抱復(fù)蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無凍存培養(yǎng)基,?10%DMSO,適用于多種干細抱和原代抱(無色素細胞除外)的

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