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技術(shù)文獻(xiàn)

?針對(duì)RAW 264.7(小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞)幾種常見的問題,來一 一為大家解答

文字:[大][中][小] 2025-5-22    瀏覽次數(shù):52    
     除了基礎(chǔ)條件,其他外界因素也容易引起細(xì)胞的“小脾氣”,比如運(yùn)輸路上的顛簸、傳代方法等等。針對(duì)幾種常見的問題,來一 一為大家解答。

養(yǎng)好RAW 264.7(小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞)之進(jìn)階篇1

問題1 :收貨后,細(xì)胞不見了

  總是會(huì)收到這類反饋:收到細(xì)胞,期待值滿滿地打開包裝,但在顯微鏡下卻找不到細(xì)胞!
  這是因?yàn)镽AW 264.7 細(xì)胞貼壁較松,快遞運(yùn)輸路上受到顛簸,可能會(huì)脫落。脫落的細(xì)胞懸浮在培養(yǎng)基中不容易聚焦。
  這時(shí)候不用擔(dān)心,把細(xì)胞放進(jìn)培養(yǎng)箱靜置兩個(gè)小時(shí)就可以看到了。
  如果靜置后看到的細(xì)胞仍偏少,請(qǐng)將瓶子里的培養(yǎng)基都轉(zhuǎn)移到離心管里,1200rpm(約250g)離心3分鐘,即可看到沉淀的細(xì)胞。
  細(xì)胞全部脫落,慌亂之下可能會(huì)一個(gè)細(xì)胞都找不著。這個(gè)時(shí)候離心驗(yàn)證是最好的方法。
  問題2 :收貨處理后,細(xì)胞不貼壁
  將細(xì)胞離心收集,用新鮮的培養(yǎng)基重懸細(xì)胞放到新的培養(yǎng)瓶里之后,可能會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞成團(tuán)漂浮、不貼壁的情況。
  這種情況下,把細(xì)胞離心收集,用1mL培養(yǎng)基重懸,慢慢地,輕輕地吹打,直到細(xì)胞被吹成單細(xì)胞,就可以重新鋪板了。
  RAW 264.7脫落后傾向于抱團(tuán),抱團(tuán)時(shí)細(xì)胞是活著的,但很難貼壁。記得一定要把聚成團(tuán)的細(xì)胞吹散成單細(xì)胞,不然細(xì)胞很難重新貼壁。
養(yǎng)好RAW 264.7(小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞)之進(jìn)階篇2
  正確的傳代方法是養(yǎng)好RAW 264.7的關(guān)鍵,每一步操作都要細(xì)致入微,稍有不慎細(xì)胞就分化了。
  RAW 264.7不能用胰酶消化,許多實(shí)驗(yàn)室用細(xì)胞刮傳代,這是一種非常經(jīng)典好用的方法。
  在養(yǎng)RAW 264.7細(xì)胞這十幾年里,摸索出一個(gè)更不錯(cuò)的方法:吹打傳代。
  吹打傳代操作簡(jiǎn)單,對(duì)養(yǎng)細(xì)胞的萌新們更友好,也能更好地控制細(xì)胞分化率。
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