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即用型PCR試劑盒
乙肝病毒共價閉合環狀 DNA(covalently closed circularDNA,cccDNA)
是乙肝病毒前基因組 RNA 復制的原始模板,雖含量較少,每個肝細胞內只有約
5~50 個拷貝,但對乙肝病毒的復制以及感染狀態的建立具有十分重要的意義,
只有清除了 cccDNA,才能徹底消除乙肝患者病毒攜帶狀態。因此 cccDNA 的
檢測具有重要的臨床意義,本產品即是乙肝病毒 cccDNA 快速檢測試劑盒。它
具有下列特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒 DNA 模板。
2. 引物經過優化,特異性高。
3. 預期的 PCR 產物長度為 367 bp。
4. 提供陽性對照,便于分析試驗結果。
5. 本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
運輸及保存:
低溫運輸,-20℃保存,保存期限一年。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 HBV cccDNA。
二、設置 PCR 反應(25 uL 體系)
1. 在 PCR 管中加入下列成分:
成 份 樣品 陽性對照 陰性對照
cccDNA 專一性引物一 2 uL 2 uL 2 uL
樣品 DNA 1-5 uL 無 無
cccDNA 陽性對照 無 2 uL 無
補超純水到 12.5 uL 12.5 uL 12.5 uL
即用型 PCR Mix 3.0 12.5 uL 12.5 uL 12.5 uL
2. 輕柔混勻后上機,按下面參數進行 PCR。
過程 溫度 時間
預變性 95℃ 10 min
PCR 反應
(30 個循環)
95℃ 10 s
55℃ 20 s
72℃ 20 s
延伸 72℃ 5 min
3. 電泳檢測 PCR 產物。預期的 PCR 產物長度為 367 bp。